细胞培养（cell culture）技术是指选用各种细胞的生存条件对活细胞进行培养和研究的技术，是广泛应用于生命科学领域的重要技术。
复苏
1.把冻存管从液氮中取出来，立即投入37℃水浴锅中，轻微摇动。液体都融化后(大概1-1.5分钟)，拿出来喷点酒精放到超净工作台里。
2.把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中(用培养基把冻存管洗一遍，把粘在壁上的细胞都洗下来)，1000转离心5分钟。
3.把上清液倒掉，加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中前后左右轻轻摇动，使培养皿中的细胞均匀分布。
4.标好细胞种类和日期、培养人名字等，放到CO2培养箱中培养，细胞贴壁后换培养基。
5.3天换一次培养基。
传代
1.培养皿中的细胞覆盖率达到80%-90%时要传代。
2.把原有培养基吸掉。
3.加适当的胰蛋白酶(能覆盖细胞就行)，消化1-2分钟。
4.细胞都变圆后加如入等体积的含血清的培养基终止消化。
5.用移液枪吹打细胞，把细胞都悬浮起来。
6.把细胞吸到15ml的离心管中，1000转离心5分钟。
7.倒掉上清液，加1-2ml培养基，把细胞都吹起来。
8.根据细胞种类把细胞传到几个培养皿中。一般，癌细胞分5个，正常细胞传3个。继续培养。
冻存
把细胞消化下来并离心(同上)。用配好的冻存液把细胞悬浮起来，分装到灭菌的冻存管中，静止几分钟，写明细胞种类，冻存日期。4℃30min，-20℃30min，-80℃过夜，然后放到液氮灌中保存。
冻存液的配制：70%的完全培养基+20%FBS+10%DMSO.DMSO要慢慢滴加，边滴边摇。
主要特征:
●二氧化碳培养箱采用流线型圆弧设计，外壳采用冷轧钢板制造，表面静电喷塑；内胆均为优质不锈钢材料制成，半圆形四角设计使清洁更方便。
●微电脑温度控制器，温度波动小，箱内装有紫外线杀菌灯可定期对箱内进行紫外线消毒，从而更有防止细胞培养期间污染。
●二氧化碳培养箱采用门温控可有效防止箱内玻璃门结露现象。
●水套式配有微生物过滤器位于进气口，提供100%过滤气体。
●配有二氧化碳培养箱减压阀。（选配）
●二氧化碳培养箱设有独立限温报警系统，超过限制温度即自动中断，保证实验安全运行，不发生意外。（选配）
技术参数:
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型号 |
HH.CP-T |
HH.CP-01 |
HH.CP-TW |
HH.CP-01W |
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容积 |
80L |
160L |
80L |
160L |
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电源电压 |
220V 50HZ |
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加热方式 |
气套式 |
水套式 |
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控温范围 |
RT+5～50℃ |
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温度分辨率 |
0.1℃ |
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温度波动 |
±0.3℃ |
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Co2控制范围 |
0~20%（配气式） |
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Co2恢复时间 |
≤浓度值×1.2min |
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加湿方式 |
自然蒸发 |
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消耗功率 |
450W |
770W |
730W |
1000W |
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内胆尺寸(mm) |
400×400×500 |
500×500×650 |
400×400×500 |
500×500×650 |
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外型尺寸(mm) |
550×610×820 |
650×710×970 |
550×610×820 |
650×710×970 |
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载物托架（标配） |
2Pcs |
3Pcs |
2Pcs |
3Pcs |
培养箱使用注意事项
1、从培养箱取放物品前，用酒精清洁双手（或手套），尽量缩短开门时间和减少开门次数。（注：培养箱中的空气是经过过滤的洁净空气。长时间敞开或频繁开关培养箱，容易造成污染。）
2、从培养箱拿取细胞时轻拿轻放，动作迅速，随手关紧培养箱门。未经允许，禁止翻看、移动他人细胞或样品，如有特殊需要的，请联系实验室负责人协调。
3、培养瓶皿放入培养箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精挥发后再放入，以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。
4、培养箱内细胞培养的放置需整洁有序，方便查找，同时应尽量提高培养箱的使用效率，负责人可视实验情况启用或停止空培养箱的使用，节约资源。
5、普通培养中的细胞，若非实验特殊需要，每瓶/板细胞每天只需要观察生长状态一次，2人以上共用的细胞，可约好时间一起观察。（注：频繁将细胞拿出观察，容易给培养箱造成污染，同时也会影响细胞生长条件的恒定。）
6、实验人员应经常注意检查培养箱温度、CO2气体量是否相符设定值。密切注意培养箱内的增湿盘，定期更换无菌水并进行消毒。密切注意培养箱内情况，如出现霉变、菌斑、支原体和衣原体感染或其他明显染菌迹象，应立即通知管理员及其它使用者。